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ELISA實(shí)驗(yàn)樣本處理的注意事項(xiàng)
閱讀：627 發(fā)布時(shí)間：2024-6-4ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類型的,，如血清,、血漿、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等，不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理辦法是不一樣的,。試驗(yàn)樣本的處理可謂是ELISA試驗(yàn)的關(guān)鍵過程之一,，所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細(xì)說說,！
一,、均質(zhì)
①安排樣本：肉、肝食品類切細(xì),，用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎,，混合均勻。
②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分,，食用部分切細(xì),，用均質(zhì)器均漿；質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗,。
③蛋類：鮮蛋去殼,，蛋黃和蛋白充沛混勻,。
④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙,，然后除去外表的水分,，取食用部分。
二,、振動(dòng)提取
將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,，振動(dòng)，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排內(nèi)部,，提取待測(cè)組分,。
①振動(dòng)辦法：振動(dòng)器上進(jìn)行上下、往復(fù)式振動(dòng),、手搖式上下振動(dòng),。
②在安排樣本中參加有機(jī)溶劑之間提取時(shí)，ELISA試劑盒應(yīng)邊加邊振動(dòng),，防止安排凝結(jié)成團(tuán),，不利于提取。
三,、乳化現(xiàn)象
在用有機(jī)溶劑提取過程中,，假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象，處理的辦法有：
①用細(xì)頭輕輕的拌和,，損壞乳化后,，再重復(fù)離心。
②再參加適量的提取劑,，重新振動(dòng),。注意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。
四,、濃縮
因?yàn)閮艋^程中引進(jìn)的溶劑,，可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或者不適宜直接剖析，需要去除全部有機(jī)溶劑,。即試劑盒前處理過程中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈?，再用?fù)溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮辦法：氮?dú)獯蹈沙s,、壓縮空氣吹干除雜,。
請(qǐng)注意：
①在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭,，防止雜質(zhì)攪擾,。
②在吹樣本時(shí)，針頭應(yīng)在液面上空,，防止與樣本觸摸,，防止發(fā)生交叉污染,。
③樣本吹干后應(yīng)立即取下，防止吹的時(shí)刻過長(zhǎng),，影響zui終檢測(cè)結(jié)果,。
④不同的藥物，吹干后樣本的保質(zhì)期不同,，ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶,。
五、凈化
經(jīng)過提取的待測(cè)組分中一般含有一些會(huì)攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或者是含有與待測(cè)物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì),。將待測(cè)組分與雜質(zhì)別離的過程,，咱們稱為試劑盒中樣本的凈化。在咱們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到常見的凈化是：液液分配法,。比方：用復(fù)溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適量的正己烷,，在參加正己烷和復(fù)溶液渦動(dòng)后假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象，能夠60℃水浴加熱,，至乳化現(xiàn)象消失或削弱后,，加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。