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分析檢測中繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線目的是可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測物質(zhì)的含量,，所以標(biāo)曲的制定是實驗室工作中必bi不可少的一環(huán),。那么問題來了，做標(biāo)準(zhǔn)曲線真的那么簡單嗎,？您所做的標(biāo)準(zhǔn)曲線真的做好了嗎?導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲的原因是什么呢,？RSD值、線性相關(guān)系數(shù)和線性方程如何,？線性好與不好分別是由于哪些原因造成的,？是儀器、標(biāo)液,，還是配制的問題,？接下來恒遠(yuǎn)生物為您揭曉答案！

一,、前期測定時注意：

1.儀器校驗好,。

2.移取液體體積要精確，保證迅速準(zhǔn)確,，盡可能用一根移液管,；為減小人為所帶來的誤差，同一種液體需由同一個人操作,；

3.保證標(biāo)準(zhǔn)品的純度，所用標(biāo)準(zhǔn)品最好是新打開的,，純度較高的固體或溶液,，防止污染,；

4.容器要保證潔凈,；

5.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品理化性質(zhì)注意加樣的先后順序；

6.如果要測OD值,，應(yīng)保證測前各管液體充分混勻,；

7.若還是有某個點誤差較大,，應(yīng)舍棄。

另外：

1.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事情,，否則后面的實驗結(jié)果將無從談起。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限,。而對于呈s型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi),。

3.最好采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,，這樣能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離,。

4.檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行,，以減少高濃度對低濃度的影響,，提高準(zhǔn)確性。

5.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點,，但至少要保證有5個點,。

6.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f,，相關(guān)系數(shù)r至少要大于0.98,，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999,。

二,、分光光度法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線所遇問題？

1.單色光純度不夠

問題：標(biāo)準(zhǔn)曲線上端向下彎曲,。

措施：光度法中要求在最大吸收峰處測定吸光度,，光度計的有效譜帶寬度越窄越好，有利于獲得純度高的單色光,。

2.比色皿的厚度或光學(xué)性能不一致

如果裝試劑空白液的比色皿較其它比色皿薄或?qū)獾奈蘸头瓷渖僖恍?，則曲線的延線與縱坐標(biāo)相交；反之,，與橫坐標(biāo)相交,。

3.顯色反應(yīng)和反應(yīng)條件的問題

當(dāng)顯色反應(yīng)的靈敏度不高時，被測物低于某一濃度就不能顯色,，當(dāng)濃度不同時,，溶液對光的吸收、散射的程度不同,，低濃度段往往彎曲,，加上濃度高時部分膠體顆粒的聚沉，致使測定的吸光度降低,，曲線上端向下彎曲,。

4.操作上的原因

問題：褪色反應(yīng)，顯色溶液的顏色不穩(wěn)定,、易褪色,，若比色時間超過了穩(wěn)定時間，標(biāo)準(zhǔn)系列中高濃度溶液顏色減褪,，致使曲線上端向下彎曲,。

措施：控制好顯色劑的加入時間，可以每加3份，停3～3min,，再加上3份,，依次進行，以使每支比色管的顯色時間相近,。

5.干擾物質(zhì)的影響

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制完畢了,，該如何檢驗？

標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗是實際操作中最大的難點,，也是工作中誤區(qū)和爭議最多的話題了,！

先來了解下最重要的三大檢驗項目：

1.精密度檢驗

標(biāo)準(zhǔn)曲線的精密度檢驗：精密度檢驗就是看試驗點距離擬合的直線的距離有無異常，所以也稱線性檢驗（擬合檢驗）,，需用F檢驗,，P<0.05作為線性檢驗合格的標(biāo)準(zhǔn)。

2.截距檢驗

3.斜率檢驗

標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距檢驗和斜率檢驗分別考察Y=a+bX中a和b與0的統(tǒng)計學(xué)差異,，a與0有差別說明有試劑空白或系統(tǒng)誤差,，而b若與0沒差別說明儀器的靈敏度根本達(dá)不到分析要求。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗應(yīng)該是線性檢驗結(jié)合失擬檢驗,，以及殘差的正態(tài)性檢驗結(jié)合才是統(tǒng)計學(xué)上比較完備的,。

要想繪制出合格的標(biāo)準(zhǔn)曲線、使用好標(biāo)準(zhǔn)曲線,，實屬不易,，所以必須將以上各個方面的條件都考慮進去，即對標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制也實行質(zhì)量控制,，只有這樣, 才能得出理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。