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隨著時(shí)代的發(fā)展,，現(xiàn)如今的生命科學(xué)事業(yè)也在蓬勃發(fā)展，國(guó)內(nèi)越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室開始做起了細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，如果你打算或者是正在做細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)?zāi)敲匆韵碌膬?nèi)容會(huì)對(duì)你的實(shí)驗(yàn)有所幫助,。

1、選擇正確的培養(yǎng)基

      在養(yǎng)細(xì)胞之前,，就要了解,，你所養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源以及種類和名稱，查閱一定量的文獻(xiàn),，確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分,，常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM,、RPMI1640、F12等等,，一些常見的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來(lái)培養(yǎng),，有的需要加入一定其他成分，這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型,，查ATCC細(xì)胞庫(kù)或者查文獻(xiàn),，才能找到所需要的培養(yǎng)液。（選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細(xì)胞的第1步）

2,、了解細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性

      不同的細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性不同,，如成纖維細(xì)胞是貼壁生長(zhǎng)，有一定的密度依賴性,，密度小可能會(huì)出現(xiàn)不增殖,，狀態(tài)差的情況，接種密度大時(shí)則需要隔天傳代,，頻繁傳代則影響細(xì)胞狀態(tài),；再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，是懸浮生長(zhǎng)的,，傳代需離心棄去上清即可,。總之,，了解細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性,，再加上正確的計(jì)數(shù)，才能掌握好傳代的密度,。

3,、選擇優(yōu)質(zhì)的血清

      血清中含有細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的生長(zhǎng)因子，作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的附加物,，血清的添加是十分重要的,，因此，選擇優(yōu)質(zhì)的血清,，是細(xì)胞養(yǎng)殖成功與否的關(guān)鍵,！

4、及時(shí)傳代和更換培養(yǎng)液

      在細(xì)胞增殖到一定的密度后要及時(shí)傳代,，根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和密度,，及時(shí)更換培養(yǎng)液。更換過(guò)勤,，浪費(fèi)培養(yǎng)液,，若不夠及時(shí)，則細(xì)胞狀態(tài)轉(zhuǎn)差,，一般需隔天更換培養(yǎng)液,，具體可根據(jù)所養(yǎng)細(xì)胞種類予以調(diào)整,。

5、絕對(duì)的無(wú)菌意識(shí)

       如果無(wú)菌意識(shí)差,，當(dāng)細(xì)胞中混入了微生物,，將會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)功虧一簣，細(xì)菌的生長(zhǎng)速度和破壞力,，將迅速占領(lǐng)培養(yǎng)皿,，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，有些初學(xué)者會(huì)在培養(yǎng)液中加入1%的雙抗,，但無(wú)菌意識(shí)不強(qiáng),，雙抗亦無(wú)法拯救你的細(xì)胞！所以在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中需要有這絕對(duì)的無(wú)菌意識(shí)才可保障細(xì)胞培養(yǎng)完好,。

6,、傾心的呵護(hù),，頻繁的觀察

      做到以上幾點(diǎn),，就可以開始養(yǎng)你的細(xì)胞了，但需要再次和大家強(qiáng)調(diào)的是細(xì)胞嬌弱,，在養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中,，難免會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題，要想成功培養(yǎng)好細(xì)胞,，應(yīng)時(shí)時(shí)注意并且不斷地對(duì)細(xì)胞進(jìn)行觀察,，初期一天可以觀察個(gè)兩次以上，出現(xiàn)任何預(yù)料外的情況應(yīng)及時(shí)處理,，才能保障后期收獲一盤“漂亮"的細(xì)胞,。

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