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恒遠(yuǎn)生物|蛋白的保存條件受哪些因素的影響呢,?
閱讀:612 發(fā)布時(shí)間:2023-9-11生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種,。所以蛋白保存也有干態(tài)保存和液態(tài)保存兩種。但是蛋白保存條件卻受諸多因素的影響,。下面就為大家分析一下影響蛋白保存條件的因素,。
蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響,主要有空氣,、溫度,、水分、光線,、酸堿度,、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng),、保存時(shí)間和容器等,;這些因素可單獨(dú)起作用,但更多情況是協(xié)同作用,;以下就對(duì)蛋白保存條件受到的影響進(jìn)行簡要分析
1. 空氣
空氣的影響主要與潮解,、微生物污染及自動(dòng)氧化等有關(guān)??諝庵械奈⑸镂廴究蓪?dǎo)致樣品腐敗變質(zhì),,吸濕后的樣品除潮解變性外也會(huì)造成微生物活動(dòng)的有利環(huán)境。某些具有較強(qiáng)還原性的樣品,,露置于空氣中不久便氧化變質(zhì),,如巰基酶的失活等。某些樣品(特別是液體樣品或半成品)在空氣中的氧化是—種自動(dòng)氧化過程,,是由空氣中的氧自發(fā)引起的游離基鏈?zhǔn)椒磻?yīng),。自動(dòng)氧化的機(jī)理很復(fù)雜:包括氧化、還原,、聚合,、水解等;氧濃度、水,、pH,、溫度、紫外線等對(duì)自動(dòng)氧化均有影響,。
2. 溫度
每種樣品均有其穩(wěn)定的溫度范圍,,溫度升高會(huì)引起許多物理和化學(xué)變化,如溫度升高l0℃,,氧化反應(yīng)約加快數(shù)倍,,酶促反應(yīng)約增加1-3倍;又如50℃以上蛋白質(zhì)容易變性,,不利于物質(zhì)的穩(wěn)定存在,。另外,適宜的溫度(如室溫)又是微生物污染的重要條件,。而低溫卻可以抑制氧化,、水解等化學(xué)反應(yīng)及微生物生長,使微生物處于生命遲緩和隱蔽狀態(tài)。故大多數(shù)生化樣品選擇低溫保存,,其穩(wěn)定性可大大增加,。
3.水分
水分也是影響樣品質(zhì)量的主要因素之一。這里所指的水分,,可能來自樣品本身,,也可能是樣品吸濕的結(jié)果。水分除直接參與水解,、酶解,、水合和加成等反應(yīng)外,還能加速氧化,、聚合,、離解和霉變。蛋白質(zhì)和酶等大分子含水量太高時(shí),,會(huì)導(dǎo)致結(jié)構(gòu)松散,,穩(wěn)定性下降而易于失活。為避開或削弱水的影響,,保存固態(tài)樣品要密閉,,液態(tài)樣品須凍結(jié)或加穩(wěn)定劑。
4.光線
某些分子可吸收某一波長的光,,反射或透過其它光波的光,。樣品吸光后,使分子活化,,內(nèi)能增加,,不利于樣品保存。在不同條件下,,樣品對(duì)光的敏感性各不相同,,受光作用發(fā)生變化的程度也不同。
5.酸堿度
酸堿度對(duì)液態(tài)樣品的保存影響較大,不同樣品的穩(wěn)定pH不同,,可由實(shí)驗(yàn)求得或從文獻(xiàn)資料查得,。液體樣品保存時(shí),常用緩沖劑控制pH,,選擇緩沖劑不僅要考慮緩沖容量的大小,,還要注意緩沖劑的種類和濃度對(duì)樣品穩(wěn)定性的影響。如青霉素用檸檬酸鹽而不用磷酸鹽和醋酸鹽作緩沖劑,,因前者的催化其水解的速度小得多,。
6.時(shí)間
不同樣品均有其不同的有效期限,因此保存的樣品需要作定期檢查,、處理或更換,。