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恒遠(yuǎn)生物|菌種保存方法有哪些,？
閱讀：505 發(fā)布時(shí)間：2023-7-12微生物為廣泛分布于自然界中的一群肉眼看不到的微小生物,，包括細(xì)菌,、螺旋體、立克次體,、衣原體,、支原體、放線菌,、真菌,、病毒等類，其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,，以單細(xì)胞,、細(xì)胞群體或非細(xì)胞狀態(tài)存在,，在提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和適宜環(huán)境的條件下,，一般都能獨(dú)立生活，迅速生長(zhǎng)繁殖,。為了避免微生物死亡,、污染，保持其原有性狀基本穩(wěn)定,，便于研究和使用,，需要用到菌種保藏技術(shù)。菌種的保存主要是指通過降低細(xì)菌新陳代謝的速度, 使細(xì)菌的生命活動(dòng)處于半yongjiu性休眠狀態(tài), 以達(dá)到長(zhǎng)期保藏的目的以及減少菌種的更新需求來(lái)降低實(shí)驗(yàn)生產(chǎn)成本,。微生物菌種的保存方法由于微生物種類的不同而略有差距,，接下來(lái)給大家介紹一些常見的菌種保存的方法：
1.低溫冷凍保藏法
該方法適合大多數(shù)需要長(zhǎng)期保存的微生物，病毒等,。原理為在超低溫環(huán)境下時(shí),，微生物代謝活動(dòng)停止，一般溫度越低效果越好,。使用凍存管對(duì)菌種進(jìn)行保存,，同時(shí)需要保護(hù)劑，一般使用甘油,、脫脂羊粉或者二甲亞砜等保護(hù)劑,。講含有菌種的凍存管置于-60~-80℃冰箱中冷凍保存。
2.液體石蠟保藏法
液體石蠟保藏法適用于一些不能分解石蠟的菌類,，例如酵母菌,、芽孢桿菌屬、青霉屬,、曲霉屬等,，一些細(xì)菌和真菌并不適合用該方法進(jìn)行保存。液體石蠟法使用液體石蠟覆蓋，微生物代謝被抑制,，菌種老化推遲,。石蠟法可以防止氧氣進(jìn)入，使得需氧菌無(wú)法繼續(xù)生長(zhǎng),，同時(shí)若培養(yǎng)基水分蒸發(fā),，容易導(dǎo)致細(xì)菌死亡，石蠟法可防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā),，延長(zhǎng)菌種保存時(shí)間,。無(wú)菌條件下將滅菌的液體石蠟注入剛培養(yǎng)好的斜面培養(yǎng)物上，液面高出斜面頂端1cm~2cm,，加膠塞并用固體石蠟封口,，使菌種與空氣隔絕。將注人石蠟油的菌種斜面直立存放于低溫（4℃~6℃）干燥處或室溫下保存,。
3.冷凍干燥保藏法
該方法適合大多數(shù)微生物的保存,，但不適用于不產(chǎn)孢子的絲狀真菌。冷凍干燥保藏法是在低溫,、干燥,、缺氧條件下保藏菌種。即在低溫條件下快速地將菌種凍結(jié),，使微生物保持完整,，然后減壓抽直空使冰升華直至脫水干燥，并在直空狀態(tài)密封隔絕空氣,，使微生物代謝活動(dòng)停止,，得以長(zhǎng)期保藏。按照一定配方配置保護(hù)劑加入安瓿管,，然后再加入菌種制備成菌懸液,。先將安瓿管進(jìn)行預(yù)凍存至-15~-20℃，然后用冷凍真空干燥機(jī)對(duì)安瓿管進(jìn)行干燥,，并將安瓿管進(jìn)行熔封,。（低溫避光保存）
4.沙土管保藏法
該方法適合用于產(chǎn)孢類放線菌、芽孢桿菌等的保存,，不適合以菌絲發(fā)育為主的真菌和病原性真菌的保藏,。使用細(xì)沙土創(chuàng)造干燥條件，使那些能夠產(chǎn)生孢子或芽孢的微生物在干燥環(huán)境中的代謝活動(dòng)減緩,，抑制其繁殖速度,，且抵抗力強(qiáng)不易死亡。該方法能減少菌株突變,，延長(zhǎng)存活時(shí)間,。將河,、海沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質(zhì),，再用80目過篩,，去掉細(xì)沙。用吸鐵石吸去鐵質(zhì),，放入容器中用10%鹽酸浸泡,，如河沙中右機(jī)物較多可用20%鹽酸浸泡。24h后倒去鹽酸,，用自來(lái)水浸泡數(shù)次至中性,，將沙子烘于或曬干。另取未被污染的地表以下十壤用100日討篩,，自來(lái)水洗至中性,，烘干。按沙：土=2：1混合均勻,，分裝人安瓿管或小試管中,，高度為1cm左右，塞好棉塞,，121℃高壓滅菌1~1.5h,，或常壓間歇滅菌3次、每天每次16,。在50℃以下烘干（溫度不宜過高，影響菌種性能）,，經(jīng)檢查無(wú)微生物生長(zhǎng)方可使用,。之后制備菌懸液并將菌懸液加入沙土管中。講含有菌懸液的沙土管放入真空干燥器中進(jìn)行真空干燥,。使用火焰封融管口,，存放于低溫（4℃~10℃）或常溫干燥處，定期檢查活力及雜菌情況,。