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人CXC趨化因子配體1(CXCL1)ELISA實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)
閱讀:596 發(fā)布時(shí)間:2023-6-14趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)是一個(gè)小分子量細(xì)胞因子,,屬于CXC趨化因子家族,以前又被稱(chēng)為GRO1致癌基因、GROα,、KC和中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP-3)。那么在ELISA實(shí)驗(yàn)中有哪些注意事項(xiàng)呢,,恒遠(yuǎn)生物小編為大家總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng),。
檢測(cè)范圍:
12ng/L - 420ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中CXC趨化因子配體1(CXCL1)含量,。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人CXC趨化因子配體1(CXCL1)水平,。用純化的人CXC趨化因子配體1(CXCL1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入CXC趨化因子配體1(CXCL1),,再與HRP標(biāo)記的CXC趨化因子配體1(CXCL1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的CXC趨化因子配體1(CXCL1)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人CXC趨化因子配體1(CXCL1)濃度。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),,最好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
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