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人白介素23試劑盒操作步驟

閱讀:1723          發(fā)布時間:2011-9-19

      人白介素23試劑盒操作步驟

 

本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍:                                                          96T
200 ng/L -5000 ng/L
 
使用目的:
人白介素23試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中白介素23(IL-23)含量
操作步驟
1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

5000ng/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
2500 ng/L
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
1250 ng/L
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
625 ng/L
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
312.5 ng/L
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干,。
6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3,。
8.         洗滌:操作同5,。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.     測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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