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人白介素23試劑盒操作步驟
閱讀:1723 發(fā)布時間:2011-9-19人白介素23試劑盒操作步驟
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍: 96T
200 ng/L -5000 ng/L
使用目的:
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
5000ng/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2500 ng/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1250 ng/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
625 ng/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
312.5 ng/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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