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恒遠(yuǎn)生物|人羊膜細(xì)胞(WISH)培養(yǎng)建議
閱讀:655 發(fā)布時(shí)間:2023-5-24品牌: 恒遠(yuǎn)生物
貨號(hào): HYCC10347
中文名稱: 人羊膜細(xì)胞,;WISH
規(guī)格: T25
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 最初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,,但隨后通過同工酶分析,、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,,證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的,;角蛋白陽性,。
培養(yǎng)條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法: 1:2~1:4傳代,,每周2~3次。
凍存條件: 無血清細(xì)胞凍存液
一,、細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解答
1.培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?
因?yàn)榕囵B(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色,,指示pH范圍為6-8,顏色會(huì)由黃變?yōu)樽霞t,。這是為了我們能更直觀觀察培養(yǎng)液的變化,,如變黃,則代表偏酸,,偏堿性了就顯示偏紫色,。一般來說,細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)后,,變黃后就暗示我們要換培養(yǎng)基啦!所以密切觀察很重要哦!
2.細(xì)胞的居住環(huán)境
舒適無菌的環(huán)境是細(xì)胞健康生活的重要基礎(chǔ),。如下圖為培養(yǎng)細(xì)胞的器皿,包括形狀,、規(guī)格,、用途多樣的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)板,。最終住進(jìn)37℃,,5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱。
3.細(xì)胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶區(qū)別?
就細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)來說,,培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿沒有太大區(qū)別,,主要在于安全系數(shù)(培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)、培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量(大培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿),。但是培養(yǎng)瓶成本也會(huì)相對(duì)較高,,因此無特殊要求,一般選擇培養(yǎng)皿即可,。
4.為什么細(xì)胞復(fù)蘇后,,很多難以貼壁?
忽略培養(yǎng)基的問題,主要考慮細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài)差或者復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作太慢導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。切記最重要的融化速度要快,,可不時(shí)搖動(dòng)冷凍管,使之盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃),。
5.細(xì)胞凍存時(shí)對(duì)細(xì)胞量有要求嗎?
細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)會(huì)有一定的細(xì)胞死亡,,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,起始濃度106—107個(gè)/ml/管,。
6.細(xì)胞污染怎么辦?
如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染,,一般建議丟棄。如果細(xì)胞非常寶貴,,可試著加入含抗生素的培養(yǎng)基反復(fù)清洗,,并用抗生素含量高的培養(yǎng)基培養(yǎng),,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。
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