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ELISA實(shí)驗(yàn)常見問題2022已更新
閱讀：944 發(fā)布時間：2022-12-27ELISA實(shí)驗(yàn)原理簡單,，步驟少,，流程短，試劑盒操作相對簡便,，實(shí)驗(yàn)小白也能輕松上手,。然而，實(shí)驗(yàn)上手雖快,，想要得到可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，卻并不那么容易。為了更好地助力科研實(shí)驗(yàn),，恒遠(yuǎn)生物在這里將大家關(guān)心的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的常見問題整理如下：
一,、關(guān)于試劑盒：
1.你們的ELISA試劑盒能檢測什么物種？
目前我們的試劑盒檢測的種屬主要為人,、小鼠,、大鼠、猴,、兔,、豬、雞,、植物等,，種屬齊全,。如果試劑盒的命名帶有特定指向（如人），代表專門針對此物種,；沒有指明物種,，則代表該試劑盒在目前公司產(chǎn)品涉及的種屬（例如人、小鼠,、大鼠,、猴、兔等）內(nèi)通用,；其他特殊種屬的檢測適用性,，請聯(lián)系技術(shù)支持確認(rèn)。
2.96TELISA試劑盒能檢測多少樣本,？是否需要做復(fù)孔,？
為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們建議標(biāo)準(zhǔn)品和樣品都做復(fù)孔,，但并不強(qiáng)行要求ELISA實(shí)驗(yàn)一定要做復(fù)孔/3復(fù)孔,，客戶可根據(jù)自己的需求設(shè)定復(fù)孔實(shí)驗(yàn)，具體實(shí)驗(yàn)情況可咨詢恒遠(yuǎn)生物技術(shù)指導(dǎo),。
3.需檢測的樣品較多,，能否減少標(biāo)曲的孔數(shù),？
為保證結(jié)果的準(zhǔn)確度,，不建議減少標(biāo)曲的孔數(shù)，請確保能夠檢測至少6個不同的標(biāo)準(zhǔn)品濃度（含空白孔),。
4.ELISA試劑盒要使用多次,，但樣本較多，是否可以只做一次標(biāo)曲,？
雖然ELISA實(shí)驗(yàn)的操作步驟相同,，但每次實(shí)驗(yàn)的各種影響因素都會有所變化。所以,，每次實(shí)驗(yàn)時,，都必須重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以得到更準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果,。如果需要做多次實(shí)驗(yàn),，溶解后的高濃度標(biāo)準(zhǔn)品可以分裝保存于-20℃條件下，避免反復(fù)凍融,，半個月內(nèi)使用有效,。
二、關(guān)于樣本
1.血清血漿樣本應(yīng)該選用哪種真空采血管收集,？
血清：不含抗凝劑的采血管/含促凝劑采血管（通常為紅色,、黃色,、橘色管蓋的采血管）
血漿：含抗凝劑的采血管（通常為綠色、紫色管蓋的采血管）
樣品收集后,，若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測,，可保存于2-8℃條件下；若不能及時檢測,，請按一次使用量分裝,，凍存于-20℃條件下（1個月內(nèi)檢測）或-80℃條件下（3個月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融,。檢測前,，應(yīng)緩慢融化冷凍過的樣本，并離心除去凍融過程中產(chǎn)生的沉淀物,。
2. 采集時,，如何盡可能避免溶血現(xiàn)象？
溶血可由多種理化因素和毒素引起,。在體外,，機(jī)械性強(qiáng)力振蕩、低溫冷凍等誘因均可引起溶血,。為避免溶血對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響,，應(yīng)注意：
（1）靜脈采血時，回抽壓力不宜過大,；
（2）一次性采血量不宜過少,；
（3）采集的全血不宜激烈振蕩；
（4）離心轉(zhuǎn)速不宜過大,；
（5）收集的全血需盡快處理成血清/血漿,，全血不能凍融；
（6）若需要麻醉采血,，需使用沒有溶血作用的麻醉劑,。
3.組織/細(xì)胞樣本收集中提到的“反復(fù)凍融"，過程應(yīng)該如何操作,？
（1）組織樣本：組織研磨后,，將其-80℃放置1h/液氮放置0.5h，再置于30℃水浴鍋中輕微振蕩,，使其迅速融化,，反復(fù)操作1-2次即可；
（2）細(xì)胞樣本：按上述操作步驟,，反復(fù)凍融2-3次,。若為膜蛋白，可以適當(dāng)做超聲處理，但需要控制好超聲的溫度,、頻率,；
4.怎樣判斷我的樣本是否需要稀釋或做其他處理？
試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍,，建議實(shí)驗(yàn)前通過相關(guān)文獻(xiàn)預(yù)估樣本中待測物的濃度,，并通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定樣本的實(shí)際濃度情況。如果是常規(guī)樣本類型,，可以咨詢ELISA技術(shù)支持,，以獲取樣本的推薦稀釋倍數(shù)，并安排預(yù)實(shí)驗(yàn)檢測,；如果樣品中待測物的濃度過高或過低,，請對樣本做適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s；如果樣本中的分析物濃度遠(yuǎn)低于試劑盒的檢測限,，建議選擇靈敏度更高的試劑盒來檢測,。
更多實(shí)驗(yàn)問題可咨詢我司業(yè)務(wù)員，為您提供專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo),。