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胎牛血清如何正確存放與解凍,干貨記得收藏
閱讀：10618 發(fā)布時(shí)間：2020-11-30Gibco澳洲胎牛血清正式回歸國內(nèi)市場(chǎng)相比大家已經(jīng)了解,。但對(duì)于胎牛血清的使用及保存,，并不是所有人都那么清楚，今天小編就以胎牛血清的儲(chǔ)存,、常見問題及處理方法進(jìn)行分析,，建議收藏！
一,、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
未拆封的血清,，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,，若一次無法用完一瓶,，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi)，再放回冷凍,。
將血清從冷凍冰箱取出后,，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融,，或通過水浴鍋促使其溶解,。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。*溶解后建議盡快使用,，若長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素,、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
總而言之：血清推薦在-10至-20℃條件儲(chǔ)存,，并避免反復(fù)凍融,。
二、血清中絮狀沉淀,，它們是什么,，怎么處理?
1.將冷凍保存的血清取出后，置4℃冰箱靜止過夜,；
2.待血清融化后,，上下顛倒，輕輕混勻,，繼續(xù)4℃2-3小時(shí),；
3.輕輕吸取上層血清，分裝，余底下50ml左右,；
4.低速離心5分鐘,，去掉沉淀。
若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),，該怎么處理?
胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,，但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,，也會(huì)存在于胎牛血清中,，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,，并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量,。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜,。
解凍胎牛血清時(shí),，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,，胎牛血清會(huì)變得混濁,，同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,，而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要,，可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻,。
三,、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
1.解凍時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,；
2.分裝凍存時(shí),，須規(guī)則搖晃均勻（小心勿造成氣泡）；
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,，較大的溫差,，易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀；
4.切勿將血清置于37℃過長(zhǎng)時(shí)間,，否則可能使之渾濁,，其中一些不穩(wěn)定的組分也會(huì)因此受到影響，終降低血清的品質(zhì),；
5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要，可以無須做此步驟,；
6.若必須做血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則,，并且保持搖晃均勻,。溫度過高、時(shí)間過久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多,。
四、血清中的“黑膠蟲”是怎么回事,？
在細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候,，有時(shí)會(huì)在400倍顯微鏡下看到小黑點(diǎn)在動(dòng)，小黑點(diǎn)有時(shí)呈點(diǎn)狀,，有時(shí)呈小的片狀,，運(yùn)動(dòng)形式為在原地振動(dòng)，類似布朗運(yùn)動(dòng),，這種小黑點(diǎn)既不是細(xì)菌,、霉菌，也不是支原體,，目前業(yè)內(nèi)人士稱其為“黑膠蟲”,。
黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭(zhēng)議,。黑膠蟲一般是存在血清里的,，而血清通常是經(jīng)過0.1μm濾膜過濾的，所以血清里不可能存在細(xì)菌,、霉菌及支原體等微生物,。如果說黑膠蟲不是生物,，它會(huì)不斷增多，達(dá)到一定數(shù)量時(shí)會(huì)與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng),，與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)培養(yǎng)基中的營養(yǎng),，從而使得細(xì)胞營養(yǎng)不足而死亡。
常見熱賣指標(biāo)：
| 品牌 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| GIBCO | 16000-044 | 500ml |
| GIBCO | 16000-036 | 100ml |
| GIBCO | 10099-141 | 500ml |
| GIBCO | 10082-147 | 500ml |
| GIBCO | 10270-106 | 500ml |
| Hyclone | SV30087.01 | 100ml |
| Hyclone | SV30087.02 | 500ml |
| Hyclone | 30084.03 | 500ml |