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干貨:細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)沉淀,什么原因?
閱讀:4537 發(fā)布時(shí)間:2019-6-19細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)中的重中之重,,細(xì)胞沒(méi)有培養(yǎng)好實(shí)驗(yàn)記性不了,,細(xì)胞培養(yǎng)好了,為后面的實(shí)驗(yàn)打下了雄厚的基礎(chǔ),!那細(xì)胞在培養(yǎng)中出現(xiàn)了沉淀,,什么原因造成的呢?您知道嗎,?好了,,不賣關(guān)子了,恒遠(yuǎn)邀您一起來(lái)看看,!
細(xì)胞培養(yǎng)中的沉淀
如果排除了污染,,細(xì)胞培養(yǎng)基中的渾濁通常被解釋為金屬、蛋白和其他培養(yǎng)基組分的沉淀,。沉淀物可能損害細(xì)胞健康,,因?yàn)樗麄兺ㄟ^(guò)螯合可移除養(yǎng)分和其他需要的組分,從而改變培養(yǎng)基的組成,。沉淀物也是顯微鏡可見(jiàn)的,,可能會(huì)干擾依賴成像的實(shí)驗(yàn)分析,。
產(chǎn)生沉淀的可能原因
一,、溫度變化
在細(xì)胞培養(yǎng)中,溫度是引起沉淀的主要因素之一,。當(dāng)遭遇溫度的變化時(shí),,高分子量血漿蛋白會(huì)從溶液中析出;熱失活和凍融循環(huán)能促進(jìn)蛋白降解和沉淀,;因?yàn)橐后w或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲(chǔ)存,,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲(chǔ)存液,。
二,、失水誘導(dǎo)的濃度改變
如果培養(yǎng)基可能蒸發(fā),,培養(yǎng)基組分(包括鹽) 的濃度將會(huì)增加,特別是培養(yǎng)基表面可能容易形成晶體沉淀,。
三,、鈣鹽
制備無(wú)血清培養(yǎng)基時(shí),組分添加的順序可能導(dǎo)致不可溶分子的形成,。鈣鹽尤其容易沉淀,,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應(yīng)產(chǎn)生CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩(wěn)定會(huì)加劇這一問(wèn)題,。
四,、金屬補(bǔ)充物
銅、鐵和鋅等金屬離子是細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的,,是無(wú)血清培養(yǎng)基的重要補(bǔ)充物,。培養(yǎng)系統(tǒng)中其他血清組分的缺失可能導(dǎo)致這些金屬沉淀,為細(xì)胞形成有毒的環(huán)境,。在較高pH環(huán)境下(一般>8時(shí)),,碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子,、碳酸鹽,、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉淀物,;在氧化條件下,,銅和鋅更易于沉淀。
五,、污染
培養(yǎng)物渾濁可能是細(xì)菌或真菌污染造成的,。
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