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國產(chǎn)ELISA試劑盒如何包被
閱讀：2058 發(fā)布時間：2019-5-21恒遠一直致力于為廣大高校,、科研院所和企事業(yè)單位提供專業(yè)的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),，滿足生物化學、分子生物學 ,、細胞生物學,、免疫學等生物科技實驗需求。的產(chǎn)品和完善的服務(wù)使我司在行業(yè)內(nèi)獲得了良好的口碑,，并且發(fā)展成為國內(nèi)生物試劑和消耗品的企業(yè)之一,。今天給大家講的是國產(chǎn)試劑盒是如何包被的，希望對做實驗是您,，能有所幫助,！
已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2-8℃)干燥的條件下一般可保存6個月。有些不完整的試盒,，僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,，檢測人員需自行包被，下面來看看國產(chǎn)ELISA試劑盒如何正確包被的,。
將抗原或抗體固定在過程稱為包被,。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程,。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,，受蛋白質(zhì)的分子量,、等電點,、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團,，故更易吸附到固相載體表面。
IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力,，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法,。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被,。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,，在這種情況下,，直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法,，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被,，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠離載體表面,，其抗原決定簇也得以充分暴露,。
間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高,，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,，重復性亦佳,。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100,。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式,。例如，在檢測抗DNA抗體時,，需用DNA作為包被抗原,，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射,，以增加其吸附性能。
固相載體先用堿性蛋白質(zhì),，如聚賴氨酸,、魚精蛋白等作預包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,，即用親和素先包被載體,，然后加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻,、牢固,，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定,。
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