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ELISA洗滌方法大揭秘
閱讀：4606 發(fā)布時(shí)間：2019-4-17上海恒遠(yuǎn)專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年,，涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,，滿足您實(shí)驗(yàn)所需，以實(shí)現(xiàn)與客戶的雙贏,，完善的庫存及供應(yīng)體系以及穩(wěn)定的專業(yè)技術(shù),，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)。期待您前來咨詢選購。近日,，客戶介紹自己在洗板操作過程遇到棘手問題,，麻煩我司技術(shù)給她提供解決處理方法及建議。主要問題如下：
問題一：說明書上說洗板時(shí)要把孔里的水甩干,，可我做的時(shí)候,，無論我怎么拍，孔底還是有殘留液體,，請問這對試驗(yàn)有沒有影響,？或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個(gè)問題？
答：有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好,，會(huì)出現(xiàn)非特異.ELISA試驗(yàn)中洗滌是關(guān)鍵.盡可能甩干,，而且盡量少拍，不一定每次都很干,，但是后一次洗滌要盡量干,。洗滌中另一個(gè)值得注意的是盡量不要出氣泡。如果有條件的話,，可用洗板機(jī),。
問題二：什么才叫封閉好了呢？有沒有什么標(biāo)準(zhǔn),？
答：一般用1%BSA,，150μl，37度,，2h,，如果還有非特異反應(yīng)的話，可能有其他原因,，比如加樣時(shí)濺到了壁上或有氣泡,，洗滌不充分，二抗?jié)舛冗^高,，封閉物不合適以及反應(yīng)條件是否得當(dāng)?shù)取?/span>
問題三：1%bsa,你是用什么稀釋的,，我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋，結(jié)果封閉的效果都不怎么明顯,，與不封閉差不多,。
答：1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作,，背景高不一定是封閉的問題,。
ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點(diǎn)
一、手工洗板方法
吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘,，根據(jù)需要,，重復(fù)此過程數(shù)次。
二,、自動(dòng)洗板
如果有自動(dòng)洗板機(jī),，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。待檢樣本：體液,、血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液,、組織勻漿、心房水標(biāo)本等,。
恒遠(yuǎn)是一家生產(chǎn)和銷售科學(xué)研發(fā)用試劑產(chǎn)品公司,，領(lǐng)域涵蓋化學(xué)、分析化學(xué),、生命科學(xué)和材料科學(xué)等基礎(chǔ)創(chuàng)新領(lǐng)域,，助力客戶的研究計(jì)劃，在廣大科研用戶的幫助和支持下,，經(jīng)過不懈的努力,，以過硬的產(chǎn)品質(zhì)量和好的服務(wù)態(tài)度，為客戶提供一個(gè)穩(wěn)定平臺(tái),，成為客戶可信賴的長期合作伙伴,。
