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細(xì)胞株培養(yǎng),您會嗎?
閱讀:1577 發(fā)布時間:2019-3-6上海恒遠(yuǎn)專業(yè)主營:細(xì)胞培養(yǎng)基,,細(xì)胞株,ELISA試劑盒,,生化試劑,,抗體,血清等科研產(chǎn)品,,從事生物科研領(lǐng)域近10年,,在同行中以產(chǎn)品齊全、價格合理,、經(jīng)營穩(wěn)健,、信息反饋及時等優(yōu)勢脫穎而出。今日給大家?guī)淼木褪羌?xì)胞株的培養(yǎng),,您了解多少呢,?恒遠(yuǎn)小編為您帶來的相關(guān)文獻(xiàn),,一起來瞧瞧!
細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群,。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。國內(nèi)資shen的細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞,。
細(xì)胞株培養(yǎng)技術(shù)的三大要點:
一,、取材
細(xì)胞株培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,,要挑選瘤細(xì)胞集中和活力較好的部位,,瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),,因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存,。細(xì)胞株的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織,。
二、成纖維細(xì)胞排除
在細(xì)胞株培養(yǎng)中?;祀s有一些成纖維細(xì)胞,,培養(yǎng)時能與瘤細(xì)胞同時生長,并常壓過癌細(xì)胞,,導(dǎo)致癌細(xì)胞生長受阻以至消失,,應(yīng)仔細(xì)排除。排除方法常有:機(jī)械刮除法,、反復(fù)貼壁法,、消化排除法、膠原酶消化法等,。
三,、提高細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實驗經(jīng)驗,細(xì)胞株要經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長,,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,,須采用一些特殊措施。如:用適宜底物,,鼠尾膠原底層及飼細(xì)胞底層等,。用細(xì)胞生長因子,根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長因子,,如胰島素,、雌激素等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng),。
總而言之,,在細(xì)胞株待轉(zhuǎn)化細(xì)胞數(shù)量明顯上升,并出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊后,可轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,,加培養(yǎng)基,,常溫培養(yǎng)半個月,一般每隔一周觀察一次,,決定是否換液,、傳代,靠譜的細(xì)胞株的每個步驟都至關(guān)重要,。細(xì)胞生長達(dá)一定數(shù)量后凍存,,凍存前應(yīng)進(jìn)行核型分析和存檔。
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