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ELISA試劑盒七大變質(zhì)原因,您知道多少
閱讀:1299 發(fā)布時(shí)間:2018-12-25ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常見(jiàn)的問(wèn)題,,那么,,ELISA試劑盒變質(zhì)是因?yàn)槭裁茨兀渴鞘裁从绊懥薊LISA試劑盒質(zhì)保,?一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢,?今天上海恒遠(yuǎn)為大家詳細(xì)分析下。
一,、方法學(xué)的影響
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法,、間接法、雙抗原夾心法,、IgM抗體捕捉法,、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不gong平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,,結(jié)果重復(fù)性較差,,質(zhì)量較難控制,。
二,、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,,并保證保存條件,。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過(guò)程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性,;對(duì)于效期短,、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,,每次使用則取分裝部分即可,,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
三,、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,,前者包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體,、異嗜性抗體,、自身抗體、溶菌酶等,,后者包括標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng),、標(biāo)本凝固不全,、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
四,、操作因素
ELISA操作步驟復(fù)雜,,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣,、溫育,、洗滌、顯色,、比色,。
五、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)報(bào)告結(jié)果,,兩者間有一條分界線(xiàn)被稱(chēng)為“陽(yáng)性判斷值”(cut-off value,CO值),,這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù),。
六、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜,,影響因素較多,,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法,,比如對(duì)HBsAg,、HBeAg、HCV-Ab,、HIV-Ab,、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽(yáng)性標(biāo)本及少見(jiàn)模式的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行復(fù)查,。
七,、常表示結(jié)果的常用方法
a.定性測(cè)定
b.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。
c.定量測(cè)定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),,結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。
恒遠(yuǎn)是一家生產(chǎn)和銷(xiāo)售科學(xué)研發(fā)用試劑產(chǎn)品,,領(lǐng)域涵蓋化學(xué)、分析化學(xué),、生命科學(xué)和材料科學(xué)等基礎(chǔ)創(chuàng)新領(lǐng)域,,助力客戶(hù)的研究計(jì)劃,在廣大科研用戶(hù)的幫助和支持下,,經(jīng)過(guò)不懈的努力,,以過(guò)硬的產(chǎn)品質(zhì)量和好的服務(wù)態(tài)度,為客戶(hù)提供一個(gè)穩(wěn)定平臺(tái),,成為客戶(hù)可信賴(lài)的長(zhǎng)期合作伙伴,!