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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)材料選擇
閱讀:2048 發(fā)布時(shí)間:2018-11-27如今,,ELISA實(shí)驗(yàn)在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,,以靈敏度高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)被廣大科研工作者親睞,那在ELISA實(shí)驗(yàn)材料上的選擇,,有那些我們值得注意的地方呢,?一起跟著恒遠(yuǎn)小編來看看吧!
一,、固相載體的選擇
不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選,用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
二,、包被抗體(或抗原)的選擇
將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,,吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),,
三,、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇
首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
四、酶的底物及供氫體的選擇
對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色,。
ELISA試劑盒性能特點(diǎn)
一,、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900,。
二,、靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 ng/mL。
三,、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
四、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
五,、貯藏:2-8℃,避光防潮保存,。
六,、有效期:6個(gè)月
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