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    一,、添加劑的添加
    1.溫度的掌握：卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。
    2.定量：過多會抑制一些目標菌,，太少又導致雜菌的過度生長,。

    二、培養(yǎng)溫度的掌握
    1.真菌類：25-28℃培養(yǎng)
    2.細菌類：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右,。
    3.其他一般在36℃左右

    三,、接種方法
    常用的方法主要有劃線、三點接種,、穿刺接種、傾注接種,、涂布接種,、液體接種。

    四,、革蘭氏染色方法
    染色時間的掌握,、沖洗的方法

    五、劃線獲得單個菌落的方法,，劃不出單個菌落的原因
    1.平板上有過多的水分,；
    2.劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復灼燒。
    3.多區(qū)劃線,，三區(qū)或四區(qū)劃線,。

    六、涂布和傾注的區(qū)別
    1.涂布利于觀察,，但由于涂布棒上會帶有少量的菌液,，影響計數(shù)的準確性。
    2.涂布更為準確,，但不利于觀察菌落的狀態(tài),。

    七、培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題
    1.滅菌溫度要嚴格控制,，按照要求滅菌,，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過高會導致糖分焦化,，影響質(zhì)量,。
    2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復溶化,。反復溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。
    3.培養(yǎng)基不能反復滅菌,，反復滅菌也會導致營養(yǎng)成分的破壞,。
    4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后，要搖勻,。

    八,、板的保存
    大多數(shù)平板如VRBA、DC,、尿素酶生化管,、顯色系列等要避光低溫保存。

    九,、產(chǎn)品的保存
    1.干粉培養(yǎng)基：避光干燥,，結(jié)塊后不能使用。
    2.亞碲酸鉀卵黃增菌液,、50%卵黃乳液等：冷凍保存,，使用時，要常溫解凍,，避免水浴加熱,。
    3.抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導致靈敏度的下降,。
    4.兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果,。

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