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如何選擇適合自己實驗的抗體呢?
閱讀:1703 發(fā)布時間:2018-8-2 八月悄無聲息的來了,八月的風(fēng),,已經(jīng)不那么的輕柔,,而帶有無言的煩躁,甚至裹著疼痛的雨,。當(dāng)我們在實驗時,,需要選擇的產(chǎn)品來確保實驗的準(zhǔn)確無誤,,那在實驗中,我們應(yīng)該如何正確的去選擇抗體呢,?
抗體品種繁復(fù),,品牌眾多,技術(shù)參數(shù)紛歧,,價格和質(zhì)量更是相差甚大,,怎么購買到高質(zhì)量價格適宜的抗體,并地做出我們想要的成果,,其中有許多細(xì)節(jié)需求留意,。今天恒遠(yuǎn)就給大家支招。
一,、一抗的挑選
1.斷定抗體的姓名,,留意中英文姓名、它名,、亞型等信息,。
2.斷定您的試驗類型,Elisa,,WB,,IHC,ICC,,仍是FACS,。一般抗體的闡明書都會列出該抗體經(jīng)驗證過適用于何種試驗的類型,,假如抗體闡明書沒有提及的使用類型,,并不意味著該抗體不適用于此種剖析使用類型,而僅是闡明尚未經(jīng)過此種試驗驗證,,請依據(jù)闡明書列出的已驗證的類型來挑選適宜您試驗的抗體,。
3.斷定試驗樣本的種屬,Human,,Mouse,,仍是Rat。一般抗體闡明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過適用于何種物種試驗,,請依據(jù)闡明書列出已驗證的種屬來挑選適宜您試驗的抗體,。
4.樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于挑選zui適宜的抗體,,待測樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過程中是否會變性,,蛋白空間構(gòu)象的改動,會影響抗體的免疫親和反響,。
5.單多克隆抗體的挑選,。市面上的抗體仍是以多克隆抗體為主,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,,檢測抗原靈敏度相對就低,;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,,靈敏度高,,但易呈現(xiàn)非特異性染色(能夠經(jīng)過封閉等避免)。
二,、二抗的挑選
1.種屬來歷,。首要依據(jù)一抗種屬來歷來決議購買二抗來歷,如一抗是小鼠來歷,,那二抗就買抗小鼠的即可(羊,、兔等均可)。
2.符號物的挑選,。有HRP,、Biotin、熒光素等符號物,。一般SP三步法二抗挑選Biotin符號的二抗,,以與后邊的SP結(jié)合反響,而免疫熒光染色就需求購買不同熒光素符號的二抗,,如羅丹明,、FITC、Cy3等常用熒光素,。
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