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恒遠解析:一抗孵育的起始條件及孵育的優(yōu)化
閱讀:5755 發(fā)布時間:2018-3-20 實驗的所有步驟都必須經(jīng)過優(yōu)化,,以便觀察到特異染色,,并盡可能減少非特異的背景染色,。這包括開展預實驗,,以確定每個一抗的適當孵育條件??乖H和純化的多克隆抗體的稀釋度通常低于單克隆抗體,,但這些值必須根據(jù)經(jīng)驗確定。
注意:為了獲得可靠特異的信號,,應采用交叉反應性極少的高質(zhì)量抗體,。
1、一抗孵育的起始條件:
2,、一抗孵育的優(yōu)化:
一抗?jié)舛?、稀釋液、孵育時間和溫度都影響了染色質(zhì)量,。這些變量需要針對每個抗體和樣品來優(yōu)化,,以便實現(xiàn)特異染色和低背景。優(yōu)化通常是保持孵育時間和溫度不變,而改變抗體濃度,,以確定何時獲得*信號和低背景噪音,。例如,如果使用高親和力的抗體,,那么相對較高的濃度可能需要較短的孵育時間,。相反,,較低的抗體濃度可能需要較長的孵育時間,。人們通常采用較長的孵育時間,以確??贵w*滲透到體視學技術(shù)所用的組織切片,。為了促進特異染色,較長時間的孵育通常在低溫下開展(即4°C vs 室溫),。
上海恒遠生物科技有限公司坐落于美麗的上海,,于2008年成立,是一家生物技術(shù)企業(yè),,主要從事免疫學,、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)及銷售。主要產(chǎn)品有進口BIM/RD/TSZ ELISA試劑盒,、NQBB/GIBCO/HYCLONE 血清,、ABCAM抗體、SIGMA/SPECTRUM/AMRESCO 生物科研試劑,、USP標準品,、實驗耗材等。公司自成立以來一直以質(zhì)量求生存,,以信譽求發(fā)展的精神,,精益求精,力求做到更好,,全體員工孜孜不倦為國內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供的產(chǎn)品服務,!