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抗性淀粉(RS)植物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
閱讀:1978 發(fā)布時(shí)間:2018-3-16抗性淀粉(RS)植物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物抗性淀粉(RS)水平,。用純化的植物抗性淀粉(RS)捕獲抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被的微孔中依次加入植物抗性淀粉(RS),,再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的植物抗性淀粉(RS)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物抗性淀粉(RS)含量,。
抗性淀粉(RS)植物ELISA試劑盒計(jì)算方法:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD值為縱坐標(biāo), 在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度,。