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您的ELISA試劑盒比色結果的表達方法對了嗎?

閱讀:1951          發(fā)布時間:2017-12-20

您的ELISA試劑盒比色結果的表達方法對了嗎?


   比色效果的表達以往通用光密度(oplical density,,OD),現(xiàn)按規(guī)則用吸光度(absorbence,,A),,兩者含義相同。通常的標明方法是,,將吸收波長寫于A字母的右下角,,如OPD的吸收波長為492nm,標明方法為"A492nm"或"OD492nm",。
   酶標比色儀簡稱酶標儀,,通常指于測讀ELISA試劑盒效果吸光度的光度計。關于固相載體方法的不相同,,各有特制的適用于板,、珠和小試管的規(guī)劃。許多試劑公司配套供應酶標儀,。酶標儀的主要功用目標有:測讀速度,、讀數(shù)的性,、重復性、度和可測規(guī)劃,、線性等等,。優(yōu)異的酶標儀的讀數(shù)通常可到0.001,,性為±1%,,重復性達0.5%。舉例說,,若某孔測得的A值為1.083,,則該孔相關于空氣的真實A值應為1.083±0.01(1.073~1.093),重復測定數(shù)次,,其A值均應1.083±0.05(1.078~1.088)在之間,。酶標儀的可測規(guī)劃視各酶標儀的功用而不相同。通常的酶標儀在0.000~2.000,,新類型的酶標儀上限拓寬達2.900,,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號標明,。應留心可測規(guī)劃與線性規(guī)劃的不相同,,線性規(guī)劃常小于可測規(guī)劃,比如某一酶標儀的可測規(guī)劃為0.000~2.900,,而其線性規(guī)劃僅0.000~2.000,,這在定量ELISA中標準曲線時應予留心。
   酶標儀不該安排在陽光或強光照射下,,操作時室溫宜在15~30℃,,運用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀效果更安穩(wěn),。
   ELISA試劑盒測讀A值時,,要選用商品的活絡吸收峰,如OPD用492nm波長,。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,,在zui適波長(W1),,第2次在不活絡波長(W2),兩次測定間不移動ELISA試劑盒板的方位,。例如OPD用492nm為W1,,630nm為W2,畢竟測得的A值為兩者之差(W1-W2),。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等形成的光煩擾,。
  肉眼判斷結果時,,顯色淺不易觀察,影響結果的準確性,,必須使用酶標儀檢測,,以保結果一致性。    

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