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技術(shù)文章

BIM試劑盒教您正確的間接法測(cè)抗體

閱讀:1764          發(fā)布時(shí)間:2017-9-1

   九月的天空好清高,。清風(fēng)涼爽,高遠(yuǎn)遼闊,。太陽(yáng)沒(méi)有辦法跨越季節(jié),,該涼的時(shí)候到了,盡管還是紅艷艷地,,也只能擺個(gè)樣子,,實(shí)在沒(méi)有夏日的威風(fēng)可耍。今天是九月*天,,也是開(kāi)學(xué)的*天,,上海恒遠(yuǎn)BIM試劑盒教您正確的間接法測(cè)抗體,希望能幫助到您,!


基本方法的操作如下:
1,、將病原體的抗原在碳酸鹽緩沖液中4~C放置一個(gè)晚上包被,形成固相抗原,,洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗原后,,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì),。
2,、加入含待測(cè)抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時(shí)間后洗板,;此時(shí),,待測(cè)抗體就會(huì)與固陽(yáng)上特異抗原反應(yīng)而吸附于固相上。
3,、加入酶標(biāo)記的抗人IgG抗體,,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),,在固相上即形成固相抗原—待測(cè)抗體—酶標(biāo)二抗復(fù)合物,。
4、加入酶底物,,溫育顯色測(cè)定,。間接法測(cè)抗體在目前應(yīng)用zui多的是丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗體(抗HIV)以及梅毒螺旋體抗體等的測(cè)定,。從上述的測(cè)定模式可見(jiàn),,間接法測(cè)抗體,,嚴(yán)格地講,所測(cè)定的僅為抗體的IgG類(lèi),,不涉及IgM和IgA類(lèi),,這是由酶標(biāo)二抗體所決定的。


   影響間接法測(cè)定抗體的一個(gè)較大的因素是包被抗原的純度?,F(xiàn)在間接法測(cè)抗體中所使用的抗原一般均為基因工程重組抗原,,如HCV的NS3,NS4,,NS5,,HIV的gp41和gpl20和梅毒螺旋體TpNl5,TpNl7,,TpN47等,。基因工程抗原在純化時(shí)應(yīng)盡量去除用來(lái)表達(dá)的宿主如大腸桿菌的抗原,,以免由于機(jī)體存在對(duì)這種宿主抗原的抗體而引起假陽(yáng)性反應(yīng),。此外,由于機(jī)體的IgG類(lèi)抗體濃度較高,,其中絕大部分為機(jī)體接觸外界環(huán)境刺激所產(chǎn)生的非特異IgG,,因此,為避免這些高濃度非特異IgG對(duì)固相的吸附所致的假陽(yáng)性反應(yīng),,通常需對(duì)待測(cè)樣本做一定程度的稀釋,。


   如果您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何不明白的問(wèn)題,都可我司業(yè)務(wù)員,,我們將為您安排技術(shù)專(zhuān)員為您解答,,助力您的科研確定實(shí)驗(yàn)!

                        

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