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BIM分享:關(guān)于酶聯(lián)免疫試劑盒實驗的操作流程描敘
閱讀：1713 發(fā)布時間：2017-4-27昨天上午我司吳在詢盤的留言上看到有客戶咨詢關(guān)于實驗正確步驟是怎樣的？在經(jīng)過一番交流后,，我司吳特意整理出實驗中的整個操作流程及注意事項與親們分享：
一,、前期準備工作：
實驗前樣本和試劑盒室溫平行1小時，如果樣本是凍存樣本，應(yīng)提前拿到2-8攝氏度進行解凍（不建議直接室溫解凍）
準備好實驗所需耗材,，蒸餾水（去離子水）,。
二、操作流程描敘：
1,，將要進行實驗的版孔進行設(shè)定好,，標準品5個點，每個點設(shè)定平行,，需要用到10個孔,，空白只需1個孔。剩下孔可以做為樣本孔,。
2,，稀釋標準，準備好5個EP管,，然后在每個EP管中加入150微升標準稀釋液,，編上編碼，分別為1,，2,，3，4,5,，在1號管中加入150標準品,，用槍頭反復(fù)吹打10次左右（注意控制幅度不要過大容易產(chǎn)生氣泡）如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋5秒左右，然后換槍頭,，在1號管中取150微升加入到2號管，后面過程一次類推,。zui后稀釋完,，前面4個管中每管液體在150微升，5號管為300微升,。濃度是從大到小,。
3，標準,、樣本,、空白加樣：標準是每個濃度點2個孔（做平行），每孔加入50微升,，加樣過程中注意換槍頭,，樣本孔中每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭,，空白孔加入50微升蒸餾水,。特別要說明的是，標準加樣和樣本加樣盡量控制在15分鐘內(nèi)加完，如果時間拖的太長,，會導(dǎo)致前面孔先反應(yīng)后面孔才開始反應(yīng),，這樣數(shù)值偏差過大。加完樣后蓋上封板膜,，至37攝氏度孵育30分鐘.
4,，洗版，在孵育過程中可以將洗滌液配好,，20ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到600ml即可,。每孔加入250-300微升的洗滌液（不要漫過版孔），（如果有震蕩儀的話,，可以講板子放入震蕩儀上5秒左右,，然后靜止三十秒，沒有請忽略次過程）將板子在桌子上晃動5秒左右,，然后靜置30秒,，甩干，拍板,。說明：甩干過程盡量要快,，1秒內(nèi)就可以完成，不要慢慢傾斜倒掉液體,，直接翻板甩掉液體即可,。拍板過程需要在桌子上墊一層吸水紙或者濾紙，版孔朝下拍幾下,，拍干區(qū)別主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬為完成,。
5，每孔加入50微升的酶標試劑,，此處在空白孔中不需要加（空白孔為空）,，孵育30分鐘。
6,，洗版同步驟4
7,，顯色，先每孔中加入50微升的顯色A液,，然后每孔中加入50微升顯色B液,。避光37攝氏度顯色15分鐘
8，終止,，每孔加入50微升的終止液,，注意，加完終止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù),，超過時間讀數(shù)無效,。在規(guī)定時間內(nèi)讀數(shù)都是有效的。
至此，整個實驗結(jié)束,。
需要額外提醒的是：在做完整個實驗過儀器之前,，儀器預(yù)熱半小時，這個計算好時間,，也可以直接將儀器一直開著,，直到整個實驗結(jié)束。
在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部,，一般槍頭都懸空,，可以將槍頭靠在孔邊緣，但槍頭尖懸空,，如果槍頭上殘留液體看整體多少量,，不要吹打下去。特別忌諱在版孔內(nèi)壁流向版孔,。整個加液過程不要產(chǎn)生氣泡,。（洗滌液除外）
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