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常見的酶聯(lián)免疫實驗問題您不知道,?
閱讀:2311 發(fā)布時間:2016-12-20
在操作酶聯(lián)免疫試劑盒實驗時,有很多技術問題是比較常見且易錯的,,而就是這些問題困惑不少實驗操作員,。上海恒遠根據技術部的問題處理總結,這些常見的酶聯(lián)免疫實驗問題您也在問,?
一,、為什么必須設置復孔?
為獲得更準確的實驗結果,,強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測,,因為復孔檢測可以:計算平均值,確保實驗結果更準確,;解決實驗中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象,;計算CV值,,對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估,。
二、重復性差怎么辦,?
1.樣品數量不一,,加樣時間長短不一(恒遠來解決:重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近),。
2.酶標儀濾光片不對或輸入波長不對(恒遠來解決:TMB顯色用450/630波長),。
3.酶標儀測定重復性差(恒遠來解決:校對酶標儀)。
三、為什么標準曲線線性較差
需要按照推薦方式保存標準品,;溶解標準品之前需短暫離心,,*收集粉末;確保標準品*溶解和混勻,,然后再進行后續(xù)的系列稀釋步驟,,確保每一步都充分混勻且移液;顯色的恰當終止,;選擇合適的數學擬合方程繪制標準曲線,。
四、為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進行加樣操作
溫度是ELISA結合反應的重要影響因素,。為了使所有樣本在一致的溫度下反應,,實驗前務必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測樣本,。避免因溫度的動力學反應差異而導致ELISA檢測結果的不準確,。
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