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目前酶聯(lián)免疫法檢測(cè)用試劑盒種類(lèi)繁多，有國(guó)外進(jìn)口的，有國(guó)內(nèi)自行研制生產(chǎn)的,，如何在眾多的品牌中選擇既能滿(mǎn)足檢測(cè)要求又價(jià)格低廉的試劑盒是一個(gè)問(wèn)題。本人根據(jù)使用這些試劑盒,，在實(shí)際檢測(cè)中發(fā)現(xiàn),，一般在試劑盒說(shuō)明書(shū)中列出以下指標(biāo)：zui低檢測(cè)限；回收率,；交叉反應(yīng)率,；標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜及數(shù)據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個(gè)濃度組成,；IC50測(cè)定值及變形曲線點(diǎn)數(shù)目的是比較規(guī)范的試劑盒,，可以選擇。以下就針對(duì)酶聯(lián)免疫試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證的幾個(gè)方法解析,，歡迎閱讀分享,。

在使用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)樣品時(shí)，應(yīng)對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證,。主要測(cè)定以下內(nèi)容：
1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定,，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個(gè)濃度組成，測(cè)定次數(shù)不少于5次,，以確定工作濃度范圍和IC50范圍,。一般臨界值為IC50附近,，檢測(cè)靈敏度高,。
2 樣品檢測(cè)限的測(cè)定,。
3 樣品添加回收實(shí)驗(yàn)。對(duì)禁用藥物可添加定量限和2倍定量限,，對(duì)于有zui高殘留*(MRL)的藥物,，可添加MRL和MRL上下各一個(gè)濃度。
準(zhǔn)確度：若回收率大于40％符合相應(yīng)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的要求,。精密度：批內(nèi)變異系數(shù)每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25％,，對(duì)于禁用藥物小于或等于30％。批間變異系數(shù)所有樣品間變異系數(shù)小于或等于30％,，對(duì)于禁用藥物小于或等于40％,。
滿(mǎn)足以上準(zhǔn)確度和精密度要求，說(shuō)明酶聯(lián)免疫方法可行,，可用來(lái)檢測(cè)藥物殘留,。
4 對(duì)于可用于多殘留檢測(cè)的試劑盒，以交叉反應(yīng)率低的藥物做陽(yáng)性添加測(cè)定臨界值(cut-off),。
5 實(shí)際檢測(cè)樣品時(shí)要包括以下實(shí)驗(yàn)：至少做兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,，兩個(gè)陰性對(duì)照品，兩個(gè)添加臨界值(cut-off)的陽(yáng)性對(duì)照品,，兩個(gè)平行的待檢樣品,。檢測(cè)結(jié)果出來(lái)后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線形狀(符合檢測(cè)要求為S形)，IC50與臨界值是否相近及陽(yáng)性樣品回收率,，樣品平行情況可確定檢測(cè)是否可信,。

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