詳細介紹
產(chǎn)品名稱:流行性乙腦病毒抗體
實驗方法:金標法
標 本:血清
規(guī) 格:20T/40T
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,,4℃過夜,。次日,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃孵育1小時,。然后洗滌。(同時做空白孔,,陰性對照孔及陽性對照孔),。
3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,,37℃孵育0.5~1小時,,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃10~30分鐘,。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”、“-”號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性。
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