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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
上海恒遠(yuǎn)生物是中國(guó)科研實(shí)驗(yàn)ELISA試劑盒專(zhuān)業(yè)供應(yīng)商，與國(guó)內(nèi)多家科研單位,、大學(xué)是合作伙伴,，信譽(yù)良好，值得信賴(lài),，“大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78"上海恒遠(yuǎn)現(xiàn)貨供應(yīng),，試劑盒價(jià)格歡迎您。
詳細(xì)介紹
本試劑僅供研究使用
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠ENA-78/CXCL5試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬,、犬、牛,、羊…
標(biāo)本齊全：血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營(yíng)品牌:美國(guó)RD分裝,，原裝、美國(guó)RB原裝
保存條件：2-8℃
提供ELISA代做實(shí)驗(yàn) 在我司購(gòu)買(mǎi)試劑盒提供免費(fèi)代測(cè)
實(shí)驗(yàn)方法：
酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
檢測(cè)原理：
采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法
相關(guān)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)：人（Human）肺炎支原體（MP）ELISA檢測(cè)試劑盒
試驗(yàn)原理：
MP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知MP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將MP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中MP的濃度呈比例關(guān)系,。
試劑盒內(nèi)容及其配制：
試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T）
塑料膜板蓋 1塊 半塊
標(biāo)準(zhǔn)品：240ng/ml 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
空白對(duì)照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
生物素標(biāo)記的抗MP抗體 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
親和鏈酶素-HRP 1瓶（12ml） 1瓶（5ml）
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
自備材料：
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200ul,、500ul、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
4.
樣品收集、處理及保存方法：
1,、 血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原
和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血紅
細(xì)胞迅速小心地分離,。
2、 血漿……EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘，取上清液,。
5,、 保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
操作注意事項(xiàng)：
● 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存,。
● 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
● 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
● 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
● 加入試劑的順序應(yīng)*,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
● 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
安全性：
1. 避免直接接觸終止液和底物A,、B，一旦接觸到這些液體,，請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
試劑的準(zhǔn)備：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻,。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
240
ng/ml （6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
120
ng/ml （5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60
ng/ml （4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30
ng/ml （3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15
ng/ml （2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5
ng/ml （1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0
ng/ml （空白對(duì)照） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。
試劑盒性能：
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
操作步驟：
1. 使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育45分鐘,。
4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育5分鐘。避免光照,。
8. 取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析：
1、 儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的MP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線,，樣品的MP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實(shí)際濃度。
3,、 檢測(cè)值范圍： 0-240ng/ml
4,、 敏感度：0.1ng/ml
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