詳細(xì)介紹
●ELISA試劑盒,,ELISPOT試劑盒
產(chǎn)品名稱:人血漿α顆粒膜蛋白
英文名稱:Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA KIT
可測(cè)種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬…
可測(cè)標(biāo)本:血清、血漿,、細(xì)胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液
規(guī)格:96T/48T 中英文雙版說明書 提供代測(cè) 科研試劑
經(jīng)營(yíng)品牌:RD,、檢測(cè)方法:ELISA
檢測(cè)類型:酶免免疫夾心法
保存:2-8℃ 兩年
組織標(biāo)本處理:
切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍吧保存?zhèn)溆茫瑯?biāo)本融化后仍然吧保持2-8℃的溫度,,加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器講標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用,。
操作步驟:
1. 使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí),。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8. 取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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