詳細(xì)介紹
【產(chǎn) 品 名 稱】:小鼠抗心磷脂抗體IgA
【英 文 名 稱】:Mouse anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA KIT
【經(jīng) 營(yíng) 品 牌】:RD ,、提供免費(fèi)待測(cè)服務(wù)!
【產(chǎn) 品 包 裝】:96T/48T
【保 存 條 件】:2-8℃
【供應(yīng) 商】:上海恒遠(yuǎn)公司(國(guó)內(nèi)供應(yīng)商)
【檢測(cè)標(biāo)本標(biāo)本】:血清或血漿/本產(chǎn)品僅供科研使用
“小鼠抗心磷脂抗體IgA”ELISA試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1.正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2.在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
?。?)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),,要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),,觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度,。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml,。
(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
?。?)酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無(wú)色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入,。
上海恒遠(yuǎn)公司提供各種種屬、各種系列ELISA檢測(cè)試劑盒,,*于實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究用,,不適用于臨床診斷。“”提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),,詳情請(qǐng)您,。