詳細(xì)介紹
elisa kit elisa實(shí)驗(yàn) 小鼠甲狀腺過氧化物酶
產(chǎn)品名稱:小鼠甲狀腺過氧化物酶
英文名稱: Mouse Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA KIT
性狀:液體
適應(yīng)癥:科研
規(guī)格:96人份/48人份
貯藏:2-8℃
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫
競爭法可用于測定抗原,,也可用于測定抗體,。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比,。操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,,形成固相抗體,。洗滌。
?。?)待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無抗原,,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合,。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會與固相抗體結(jié)合,,競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會,,使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,,保溫后,,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量。洗滌,。
?。?)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,,代表受檢標(biāo)本抗原的量,。待測管顏色越淡,表示標(biāo)本中抗原含量越多,。
Elisa間接法,、競爭法、捕獲法,,應(yīng)用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,,可由蛋清中提取。分子量60kD,,每個分子由4個亞基組成,,可以和4個生物素分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素,。生物素又稱維生素H,,分子量244.31,存在于蛋黃中,。用化學(xué)方法制成的衍生物,,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物,。親和素與生物素的結(jié)合,,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),,親和力大,,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結(jié)合位置,,可以連接更多的生物素化的分子,,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來,,就可大大提高ELISA的敏感度,。
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