詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2
英文名稱(chēng):Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
檢測(cè)范圍:請(qǐng)咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)人員
保存條件:2-8℃,。
有效期:6個(gè)月
運(yùn)輸條件低溫運(yùn)輸,,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸,。
操作步驟
方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,,4℃過(guò)夜,。次日,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,,下同),。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),。然后洗滌,。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔),。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),,洗滌,。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘,。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽(yáng)性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽(yáng)性。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn),。
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