詳細介紹
elisa實驗 elisa法 小鼠水通道蛋白5
產(chǎn)品名稱:小鼠水通道蛋白5
英文名稱:Mouse Aquaporin 5,AQP-5 ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
檢測范圍:請咨詢我司業(yè)務(wù)人員
保存條件:2-8℃,。
有效期:6個月
運輸條件低溫運輸,,用干冰或者冰袋低溫運輸。
競爭法可用于測定抗原,,也可用于測定抗體,。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下:
?。?)將特異抗體與固相載體連接,,形成固相抗體。洗滌,。
?。?)待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng),。如受檢標(biāo)本中無抗原,,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合,,競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機會,,使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,,保溫后,,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達zui充分的量。洗滌,。
?。?)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測管顏色越淡,,表示標(biāo)本中抗原含量越多,。
Elisa間接法、競爭法,、捕獲法,應(yīng)用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,,可由蛋清中提取,。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,,可以和4個生物素分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素,。生物素又稱維生素H,分子量244.31,,存在于蛋黃中,。用化學(xué)方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì),、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物,。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),,但特異性強,,親和力大,,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結(jié)合位置,,可以連接更多的生物素化的分子,,形成一種類似晶格的復(fù)合體,。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來,,就可大大提高ELISA的敏感度,。
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