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elisa原理  elisa實(shí)驗(yàn) 人12羥二十烷四烯酸（12-HETE）

【產(chǎn)品英文名稱】：Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA KIT

【產(chǎn) 品 包  裝】：96T/48T 中英文雙版說明書 提供代測 科研試劑

【經(jīng)營品牌】：RD 、 RB ,、IBL

【保存條件】：2-8℃

【供應(yīng)商】：上海恒遠(yuǎn)生物（國內(nèi)供應(yīng)商）

【檢測標(biāo)本標(biāo)本】：血清或血漿/本產(chǎn)品僅供科研使用

  ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡稱,。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,，發(fā)展十分迅速,，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

 

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18～24小時,。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時,，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml,。
　　（3）　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
　　（4）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),，而本身無色,。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入。

人12羥二十烷四烯酸（12-HETE）相關(guān)試劑盒：

 人12羥二十烷四烯酸ELISA試劑盒 Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA KIT
人羥脯氨酸ELISA試劑盒 Human hydroxyproline,Hyp ELISA KIT
人一氧化氮ELISA試劑盒 Human nitric oxide,NO ELISA KIT
人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78ELISA試劑盒 Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA KIT
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人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1ELISA試劑盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA KIT
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elisa原理  elisa實(shí)驗(yàn) 人12羥二十烷四烯酸（12-HETE）

人12羥二十烷四烯酸（12-HETE）注意事項(xiàng)
　　1.　正式試驗(yàn)時,，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
　　2.　在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,，其中包括:
　　（1）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體,，如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被,，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
　　（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用

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