詳細(xì)介紹
●ELISA試劑盒,,ELISPOT試劑盒
產(chǎn)品名稱:大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1
英文名稱:Rat Eotaxin 1 ELISA KIT
可測(cè)種屬:人、大小鼠,、豚鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬…
可測(cè)標(biāo)本:血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液
規(guī)格:96T/48T 中英文雙版說(shuō)明書(shū) 提供代測(cè) 科研試劑
經(jīng)營(yíng)品牌:RD、RB,、IBL
保存條件:2-8℃
操作步驟
用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,,下同),。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),。然后洗滌,。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔),。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),,洗滌,。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘,。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”,、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽(yáng)性,。