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大鼠堿性磷酸酶  Rat alkaline phosphatase,ALP ELISA KIT 

產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份     保存條件：2-8℃
產(chǎn)地：美國
實(shí)驗(yàn)方法：
酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
檢測原理：
采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理
操作步驟
用于檢測未知抗體的間接法：　　　
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml,，每孔加0.1ml,，4℃過夜。
2,、次日洗滌3次,。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白,、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌,。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5,、6,。
3.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘。
4.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
5.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。
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