詳細介紹
企業(yè)單位:上海恒遠ELISA試劑盒供應商 產(chǎn)品單價:請來電詢價()
大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T Rat cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份 保存條件:2-8℃
產(chǎn)地:美國
實驗方法:
酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
檢測原理:
采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理
操作步驟
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,,4℃過夜。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘,。(簡稱洗滌,,下同),。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,。然后洗滌,。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔),。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,,洗滌,。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘,。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”、“-”號表示,。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值,,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性,。