大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒操作簡便，無需特殊設(shè)備，并具有高度的敏感性和準確性,，所以受到大家的廣泛重視,，以致在較短時間內(nèi)，于國內(nèi)外均取得了較快的進展,。特點：靈敏度高,，檢測能力可達10-6mg/ml水平；應(yīng)用范圍廣,，既能檢測抗原又能檢測抗體,，既能定性又能定量；有效期長,，酶標抗體于普通冰箱中可保存一年以上,，效價不下降，制成的標本,，可長久保存,，供隨時復(fù)查用。

酶聯(lián)免疫吸附試驗法是以固相載體吸附技術(shù)和免疫酶技術(shù)相結(jié)合建立的一種檢測方法大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒操作簡便,，無需特殊設(shè)備,，并具有高度的敏感性和準確性，所以受到大家的廣泛重視,，以致在較短時間內(nèi)，于國內(nèi)外均取得了較快的進展,。
ELISA的特點 靈敏度高,，檢測能力可達10-6mg/ml水平；應(yīng)用范圍廣,，既能檢測抗原又能檢測抗體,，既能定性又能定量；有效期長,，酶標抗體于普通冰箱中可保存一年以上,，效價不下降，制成的標本,，可長久保存,，供隨時復(fù)查用。
［附］：免疫酶染色法（組化法） 該法的原理與免疫熒光法相似,，不同之處在于用酶標記的抗體,，稱酶標抗體。酶標抗體與抗原發(fā)生特異性結(jié)合,，當加入酶的底物時,，底物在酶的催化下，發(fā)生組織化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì),，該物質(zhì)不需特殊儀器,，在光學(xué)顯微鏡下即能觀察，目前常用的酶是HRP,，底物為DAB,，可棕褐色沉淀物，使玻片組織標本上的抗原所在部位呈現(xiàn)顏色,。 大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒 ELISA測定時一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果,。ELISA操作較繁雜，操作不當將引起較大的誤差,。在操作中應(yīng)注意以下5個方面,。
1．隨著病情的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,，因此有必要對標本進行預(yù)處理,，例如對血清標本作適當稀釋，或離心分離血脂等,。間接法測定中,，標本適當稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2．加樣一般使用加液器,，在ELISA中一般有4次加樣：加標本,、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液,。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,，以免交叉污染。加酶結(jié)合物,、底物和終止液時則不需更換吸嘴,。
3．在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時差的影響,。加樣及混勻時間的差異,，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*，對競爭法及定量檢測影響很大,，不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準,。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,，終止抗原抗體反應(yīng),，除去標本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì),?？捎孟窗鍣C洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一,，批內(nèi),、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,，差異不宜太大,。
5．準確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀（酶標儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長,，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,，以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標儀具有良好的重復(fù)性,。
大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒 實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,，制成固相載體，往包被抗D-LDH抗體的微孔中依次加入標本或標準品,、生物素化的抗D-LDH抗體,、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D-LDH呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度。