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產(chǎn)品名稱：小鼠脂聯(lián)素    

英文名稱：Mouse adiponectin,ADP ELISA KIT

產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份  
檢測范圍：請咨詢我司業(yè)務(wù)人員
保存條件：2-8℃。
有效期：6個月
運輸條件低溫運輸,，用干冰或者冰袋低溫運輸,。
 操作步驟
     方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃過夜,。次日，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘。（簡稱洗滌,，下同）,。
　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時,。然后洗滌,。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）,。
　　3.　加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時,，洗滌,。
　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘。
　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強,，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。
　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml,，每孔加0.1ml,，4℃過夜。
2,、次日洗滌3次,。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白,、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌,。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5,、6,。
3.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘,。
4.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
5.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強,，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上,，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性。

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