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產(chǎn)品名稱：小鼠糖蛋白130    
英文名稱：Mouse glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT

產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人、大小鼠,、豚鼠,、兔子、豬,、犬,、牛、羊…
標本齊全：血清,、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿,、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月
運輸條件低溫運輸,，用干冰或者冰袋低溫運輸,。
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù),。此項技術(shù)自70年代初問世以來,，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領(lǐng)域,。 　　
（一）原理
　　ELISA是以免疫學反應為基礎(chǔ),，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù),。由于抗原,、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應物,，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,，通過不同的設(shè)計,，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）,、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　
（二）操作步驟
     方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml,。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,，4℃過夜。次日,，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘,。（簡稱洗滌,，下同）,。
　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,，置37℃孵育1小時。然后洗滌,。（同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔）。
　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃孵育0.5～1小時,，洗滌。
　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘,。
　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上,，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。
　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　
1,、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml,，4℃過夜,。
2、次日洗滌3次,。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌,。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4,、5、6,。
3.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘。
4.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。
5.　結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強,，陰性反應為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上,，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。

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