上海恒遠(yuǎn)生物長期代理美國進(jìn)口分裝、原裝ELISA“人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白",，現(xiàn)貨供應(yīng),，物美價廉。中英文雙版說明書,，提供免費(fèi)代測服務(wù),。需要產(chǎn)品以及其它詳細(xì)信息請直接我司在線人員或業(yè)務(wù)人員。

產(chǎn)品名稱：人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白    
英文名稱：Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA KIT 
性狀：液體     
適應(yīng)癥：科研     
規(guī)格：96人份/48人份     
貯藏：2-8℃     
檢測方法：ELISA酶聯(lián)免疫     
產(chǎn)品用途: For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費(fèi)代測服務(wù).
試劑器材
　　1.　試劑
　?。?）　包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:
　　　　NaCO31.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸餾水至1000ml　　
    （2）　洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4?12H2O　2.9克　NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
　?。?）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5～10％使用,。
　?。?）　終止液（2M H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml,。
　?。?）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 檸檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸餾水50ml,。
　　（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇） 0.5ml底物緩沖液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl
　?。?）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl
　?。?）　抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體,。
　?。?）　正常人血清和陽性對照血清。
　　2.　器材:
　?。?）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標(biāo)板）40孔或96孔,，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器,，塑料滴頭,，小毛巾，洗滌瓶,。
　?。?）　小燒杯、玻璃棒,、試管,、吸管和量筒等。
　?。?）　4℃冰箱,，37℃孵育箱。
注意事項
　　1.　正式試驗(yàn)時,，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
　　2.　在ELISA中，進(jìn)行各項實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,，其中包括:
　?。?）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
　?。?） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度,，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時,。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后,，在其它試驗(yàn)條件相同時,，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml,。
　　（3）　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
　?。?）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),，而本身無色,。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入,。

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