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人血清總補體 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA KIT

產品規(guī)格：96人份/48人份     保存條件：2-8℃
產地：美國
實驗方法：
酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
檢測原理：
采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理
操作步驟
     方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml,。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,，4℃過夜。次日,，棄去孔內溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘,。（簡稱洗滌,，下同）。
　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,，置37℃孵育1小時,。然后洗滌,。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）,。
　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時,，洗滌,。
　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘,。
　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　結果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深,，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺,，依據所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上,，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處,，以空白對照孔調零后測各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。
　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　
1,、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml,，4℃過夜,。
2、次日洗滌3次,。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌,。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4,、5、6,。
3.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘。
4.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
5.　結果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深,，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺,，依據所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上,，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處,，以空白對照孔調零后測各孔O?D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。
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