詳細(xì)介紹
一,、GIBCO,DMEM basic 高糖血清概述
采用正常人血液為原料,,經(jīng)無菌采集,、分離、微孔過濾后而成,。本產(chǎn)品無支原體,、無病毒、無噬毒體,、內(nèi)毒素含量低于1EU/ml,,適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng),、細(xì)胞株保藏,、單抗研制,是醫(yī)院,、科研院校,、動物疫苗,、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。
主要成分分析
由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,,其組成成份雖大部分已知,,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡,、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度,、酸堿度,、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白,、α1,、α2、β,、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等,。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、激素,、無機物等,這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的,。
二,、注意事項
1,、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,,然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-2O,。C至4。C至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20,。C至37。C),,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
2,、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生
3、請勿將血清置于37,。C太久,。若在37。C放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量,。
4,、保存方法
血清應(yīng)保存在-5C至-2OC。然而,,若存放于4C時,,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。
三,、操作問題
如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
1,、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O,。C至4,。C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20,。C至37,。C),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
2,、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生
3、請勿將血清置于37,。C太久,。若在37。C放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量。
4,、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,可以無須做此步驟,。
5,、若必須做血清的熱滅活,請遵守56,。C,,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞過濾膜,。
四、操作流程
采 血:胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血,。馬血清采自供體動物,。新生牛血清采自出生10至14天的小牛。全部按照工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)采血,。
處 理:
全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理,。血清和凝塊分離后立即將血清合并并冷凍。只有符合我們的檢測標(biāo)準(zhǔn)的血清才被接受作進一步處理,。
熱滅活血清:熱滅活是在56℃水浴中嚴(yán)格控溫30分鐘,。
操作實驗中,血清有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長速率的
降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,,像是"小黑點",,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37C環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您,,若非必須,,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,,不但節(jié)省您寶貴的時間,,更確保您血清的質(zhì)量!
另外,購買已滅活成品也不失一個捷徑,,請在購買的時候注意詢問廠家是否是已滅活血清要作用
解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4,。C至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37,。C),,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
五,、GIBCO,,DMEM basic 高糖血清相關(guān)產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品名稱 | 容量 |
| (ml)/ g |
胎牛血清(北美血源) | 100ml/瓶 |
胎牛血清(澳洲血源) | 100ml/瓶 |
特級胎牛血清 | 200ml/瓶 |
優(yōu)級胎牛血清 | 200ml/瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 | 200ml/瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 | 100ml/瓶 |
特級馬血清 | 200ml/瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)馬血清 | 200ml/瓶 |
人血清(混合血型) | 100ml/瓶 |
人AB血清(AB血型) | 100ml/瓶 |