操作過程中可能出現的問題和解決方法

問題

可能原因

解決方法

顯色淡,，靈敏度偏低

1、試劑盒在運輸途中時間太長,，溫度太高

盡量縮短運輸時間,，夏季應放冰塊降溫

2、試劑盒未充分平衡

試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋,，于室溫平衡至少20分鐘,，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。

3,、培養(yǎng)箱溫度不足37℃

注意培養(yǎng)箱溫度,，放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應注意

4,、保溫時間不足

校正定時鐘準確定時

5、洗滌時沖擊力太大,、浸泡時間過長,、洗滌次數增加

按說明書要求保留洗滌時間,，準確記住洗滌次數

6、移液器吸液量不足,，吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔

校正移液器,，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密,，吸嘴內壁要清潔,，一次性使用

7、蒸餾水水質有問題

使用新鮮合格的蒸餾水

8,、底物作用時間不足

準確定時

背景深,，全部呈有色

1、洗滌不充分,，洗后未拍干,，樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留

濃縮洗液準確配制；10倍濃縮洗滌液如有結晶則應讓結晶于室溫全部溶解后再量取稀釋,；充分洗滌,，*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應棄去不用,，不要反復使用,，否則易造成污染

2、樣品污染

樣品應新鮮采集,，或低溫保存,，防止污染

3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應時間過長

調整培養(yǎng)箱溫度,，準確定時

4,、吸嘴重復使用，未洗凈或消毒不*

吸嘴盡可能一次性使用

5,、蒸餾水被污染

使用新鮮蒸餾水

6,、酶等試劑混用

不同批號試劑勿混用

7、一次實驗的標本量過多,，加樣時間太長,，導致實際反應時間延長

合理安排實驗，避免幾塊酶標板同時加樣

重復性不佳

1,、樣品數量多少不一,，加樣時間有長有短

重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近

2,、保溫時間不*,，洗滌條件不*，操作人員不*

重復測定標本，操作條件,、人員等應盡可能與上次保持*,，以排除這些因素造成的不*的可能性

3、加樣量不*

樣品稀釋前應充分混勻,，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴

出現白板,陽性對照不顯色

顯色液變質

更換新的顯色液

洗滌液配制有誤

請按說明書所示稀釋倍數配制

未加酶結合物而認為已加入

注意不要漏加

終止液誤作洗滌液稀釋或當底物液使用

每次加液前均應看清標簽