詳細介紹
ELISA實驗是一種簡易操作,,敏感性高,特異性強,,重復(fù)性好的實驗診斷方法,。在我們國家的科研單位、高校,、醫(yī)療實驗室都應(yīng)用的比較成熟,。
一、操作要求
1.按說明書的要求準備實驗中需用的試劑,。
2.ELISA試劑盒中用的蒸餾水或去離子水,,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。
3.自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正,。
4.從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。
5.試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存,。
Human factor BF ELISA KIT是*科研界較認可的檢測方式,,中文名稱:人因子(BF)ELISA試劑盒 ,試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
二,、操作方法
各種類型ELISA測定時一般需經(jīng)過這些步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果,。
1.重復(fù)某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近,。
2.加樣后在混勻器上充分混勻,。
三,、ELISA結(jié)果處理
1.ELISA實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%,。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.制作標準曲線,。
以減去本底后的OD值為X軸,,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法,。建議使用合適的軟件來作圖,,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線,、半對數(shù),、對數(shù),、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程,。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標準品的濃度作為未知數(shù),,將對應(yīng)的OD值帶入該方程,,計算出標準品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近(+/-10%),。選擇擬合度zui高的那條曲線,。
四、怎樣購買“Human factor BF ELISA KIT",?
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