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     大家都知道,，ELISA試劑盒憑敏感性高,、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),，在科研中深受喜愛,。而市面上各種試劑盒，數(shù)不勝數(shù),。不光要考慮質(zhì)量,、價(jià)格等問題，還要參考其技術(shù)條件,。三思而后行,，購(gòu)買ELISA試劑盒請(qǐng)您注意：
    一、ELISA試劑盒雖然有多種類型,，不過它們都有一個(gè)共同特點(diǎn),，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲,。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)ELISPOT是兩種特殊的類型,，In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè),。ELISPOT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot,，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，然后在膜上檢測(cè)細(xì)胞分泌的抗原形成斑點(diǎn),。此外,，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)。
    
    二,、如今檢測(cè)ELISA有許多途徑,，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶（例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP）,，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物（如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB）,。這種酶促反應(yīng)具有特征性的顏色,，可以通過分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶,。酶可以結(jié)合在一抗上,，也可以結(jié)合在二抗上,，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外ELISA的結(jié)果檢測(cè)還包括放射性檢測(cè),、熒光檢測(cè),、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測(cè)等。
    三,、單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒,，實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。例如,，對(duì)于雙抗夾心法而言,，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測(cè)有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,，隨后單抗再特異性檢測(cè)擁有特定抗原表位的抗原,。
    

    四、如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性,。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素,。盡管現(xiàn)在購(gòu)買源自動(dòng)物的抗體越來越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題,。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí),，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng),。如果檢測(cè)用二抗與捕獲抗體結(jié)合,，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗,，來避免上述問題,。
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