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血漿游離血紅蛋白測(cè)定
閱讀：2683 發(fā)布時(shí)間：2012-10-15血漿游離血紅蛋白實(shí)驗(yàn)原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,，由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,，可測(cè)出其含量,。
實(shí)驗(yàn)方法
材料：
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2．1%H2O2
3．10%醋酸溶液
4．分光光度計(jì)
方法：
1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝,，離心分離血漿,。
2．按下表進(jìn)行操作，用分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為530nm,，以空白管調(diào)零,，測(cè)定測(cè)定管的吸光度。
| 試劑 （ml） | 測(cè)定管 | 空白管 |
| 2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液 | 0.5 | 0.5 |
| 患者血漿 | 0.02 | / |
| 1% H2O2 | 0.5 | 0.5 |
| 混勻后室溫放置10min | ||
| 10%醋酸溶液 | 5.0 | 5.0 |
| 室溫放置10min | ||
3.計(jì)算公式
血漿游離Hb（mg/L）=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
參考范圍：0-40mg/L
注意事項(xiàng)
1.一切容器避免血紅蛋白污染,；
2.采血要順利,，器皿要干燥，檢測(cè)血漿要新鮮,，及時(shí)分離,，防止人為溶血；
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,，檢測(cè)時(shí)要小心,，廢液要妥善處理，以免污染,；
4.雙氧水要新鮮配置,，濃度要準(zhǔn)確。
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