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ABS-ELISA試劑盒常見方法下載
閱讀：1512 發(fā)布時(shí)間：2013-4-28| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 6KB |
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ABS-ELISA試劑盒常見方法
ABS為親和素（avidin）生物素（biotin）系統(tǒng)（system）的略語。親和素是一種糖蛋白,，分子量60000，每個(gè)分子由4個(gè)能和生物素結(jié)合的亞基組成。生物素為小分子化合物，分子量244,。用化學(xué)方法制成的衍生物素-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成生物素標(biāo)記產(chǎn)物，標(biāo)記方法頗為簡(jiǎn)便,。生物素與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性,，其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定,。由于一個(gè)親和素可與4個(gè)生物素分子結(jié)合,，因此如把ABS與ELISA法可分為酶標(biāo)記親和素-生物素（LAB）法和橋聯(lián)親和素-生物素（ABC）法兩種類型。兩者均以生物素標(biāo)記的抗體（或抗原）代替原ELISA系統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體（抗原）,。在LAB中,，固相生物素先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng)，然后再加酶標(biāo)記的生物素以進(jìn)一步提高敏感度,。在早期,，親和素從蛋清中提取，這種卵親和素為堿性糖蛋白,，與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng),，用于ELISA中可使本底增高,。從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點(diǎn)，在ELISA應(yīng)用中有替代前者的趨勢(shì),。由于ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩種試劑，增加了操作步驟,，在臨床檢驗(yàn)中ABS-ELISA應(yīng)用不多,。
ELISA的原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。由于酶的催化效率很高,，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度
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