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羊免疫球蛋白E試劑盒說明書下載
閱讀：655 發(fā)布時間：2013-1-15羊免疫球蛋白E試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍： 96T
30μg/ml -850μg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定羊血清,、血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白E（IgE）含量,。
羊免疫球蛋白E試劑盒組成
| 1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品（1600μg/ml） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
羊免疫球蛋白E試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
| 800μg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 400μg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 200μg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 100μg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 50μg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
3. 溫育：用封板膜封板后置
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，
避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
ELISA試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果,。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣,。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）,。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2
2．有效期：6個月
羊免疫球蛋白E試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中羊免疫球蛋白E（IgE）水平,。用純化的羊免疫球蛋白E（IgE）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E（IgE）,，再與HRP標記的免疫球蛋白E（IgE）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E（IgE）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中羊免疫球蛋白E（IgE）濃度。