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羊白細(xì)胞介素2試劑盒使用說明書下載

閱讀:170          發(fā)布時(shí)間:2012-12-5
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              羊白細(xì)胞介素2試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用,。

檢測范圍:                                                          96T

0.5ng/L - 8ng/L 

使用目的:

本試劑盒用于測定羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素2IL-2含量,。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中羊白細(xì)胞介素2IL-2水平,。用純化的羊白細(xì)胞介素2IL-2抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素2IL-2),,再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素2IL-2抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素2IL-2呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中羊白細(xì)胞介素2IL-2濃度,。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

30ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(16ng/L

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1個(gè)

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

羊白細(xì)胞介素2試劑盒操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

8ng/L

5號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

4ng/L

4號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2ng/L

3號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1ng/L

2號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.5ng/L

1號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。

3.         溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  

4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。

7.         溫育:操作同3

8.         洗滌:操作同5,。

9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,

37

 

避光顯色15分鐘.

10.     終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

 

11.     測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

羊白細(xì)胞介素2試劑盒注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。

4.  請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.  封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn),。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8,。

2.有效期:6個(gè)月

 

科研樣品ELISA檢測服務(wù)

凡購買本公司目錄任何一種ELISA試劑盒,,您只需將需要檢測的動(dòng)物種類和檢測指標(biāo)(介素類、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T )通知公司業(yè)務(wù)員即可,。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報(bào)告交到客戶手中!歡迎臨床醫(yī)學(xué)界和各科研單位在各種項(xiàng)目上與我們開展不同層次的密切合作,,以雙贏求發(fā)展,,共同進(jìn)步,為中國檢測事業(yè)的發(fā)展積累經(jīng)驗(yàn),。 

 

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