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山羊痘抗體（Pox-Ab）說(shuō)明書(shū)
閱讀：336 發(fā)布時(shí)間：2011-11-8| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 27.5KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 336次 |
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山羊痘抗體（ Pox-Ab）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用
使用目的：
山羊痘抗體試劑盒用于測(cè)定山羊血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中山羊痘抗體（ Pox-Ab）含量。
實(shí)驗(yàn)原理
山羊痘抗體試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中山羊痘抗體（ Pox-Ab）水平,。用純化的抗原包被微孔板,，制成固相抗原,，往包被單抗的微孔中依次加入山羊痘抗體（ Pox-Ab）,，再與 HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,，形成抗原 -抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色,。 TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的山羊痘抗體（ Pox-Ab）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（ OD值）,，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中山羊山羊痘抗體（ Pox-Ab）濃度。
山羊痘抗體試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（ 120pg/ml） 0.5ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔 × 8條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說(shuō)明書(shū) 1份
5 顯色劑 A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑 B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個(gè)
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于 -20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品,，因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（ HRP）活性,。
山羊痘抗體試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘,。
4. 配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去,，如此重復(fù) 5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻,， 37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零,， 450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（ OD值）,。測(cè)定應(yīng)在加終止
60pg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30pg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15pg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5pg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3.75pg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
山羊痘抗體試劑盒注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在 5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本 OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值）,，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（ n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存,。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn) .
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn),。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期： 6個(gè)月